Existem muitas maneiras diferentes de preparar soluções de PBS (uma delas é a solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco (DPBS), que tem a mesma composição do PBS padrão) . Algumas formulações não contêm potássio e magnésio, enquanto outras contêm cálcio e / ou magnésio (dependendo se o tampão é usado ou não em tecido vivo ou fixado: o último não requer KCl ou MgCl2).
Comece com 800 mL de água destilada para dissolver todos os sais. Adicione água destilada a um volume total de 1 litro. O 1 × PBS resultante terá uma concentração final de 157 mM Na +, 140mM Cl−, 4,45mM K +, 10,1 mM HPO42−, 1,76 mM H2PO4− e um pH de 7,96. Adicione 2,84mM de HCl para mudar o tampão para 7,3 mM HPO42− e 4,6 mM H2PO4− para um pH final de 7,4 e uma concentração de Cl− de 142 mM.
O pH do PBS é ~ 7,4. Ao fazer soluções tampão, é uma boa prática sempre medir o pH diretamente usando um medidor de pH. Se necessário, o pH pode ser ajustado usando hidr ácido oclórico ou hidróxido de sódio.
O PBS também pode ser preparado usando comprimidos ou bolsas de tampão PBS fabricados comercialmente.
Se usado na cultura de células, a solução pode ser dispensada em alíquotas e esterilizada por autoclavagem ou filtração. A esterilização pode não ser necessária dependendo de seu uso. O PBS pode ser armazenado em temperatura ambiente ou na geladeira. No entanto, soluções estoque concentradas podem precipitar quando resfriadas e devem ser mantidas em temperatura ambiente até que o precipitado esteja completamente dissolvido antes do uso.