Introdução
“Abby! Não deixe o cachorro lamber você! A língua dela está cheia de bactérias! “Desde que compramos um cachorro, alguns anos atrás, minha mãe sempre dizia isso. Adoro quando meu cachorro corre para me cumprimentar quando eu chego em casa da escola e diz” olá “, dando-me lambidas. O que eu odiava, porém, era me sentir culpado e enojado por ter a bactéria canina dela em todo o meu rosto. Então, decidi fazer um teste para ver o quão sujas são as línguas dos cães.
Hipótese
Eu imaginei que línguas humanas seriam mais limpas do que línguas de cachorro. Eu pensei isso porque os humanos escovam os dentes pelo menos uma vez por dia. Eu imaginei que as línguas dos cães “seriam sujas porque eles estavam sempre lambendo coisas sujas como lixo.
Pesquisa de base
Eu li sobre bactérias em vários sites diferentes, incluindo a Universidade de Museu de Paleontologia e Wikipedia da Califórnia. Também li um artigo do Journal of the American Academy of Dermatology chamado “Dog, Cat, and Human Bites: A Review”. Por último, li um artigo do Journal of Clinical Microbiology denominado “Cultivable Oral Microbiota of Domestic Dogs.”
O que aprendi com meus estudos de bacteriologia é que as bactérias foram chamadas de “animálculos” por Antonie van Leeuwenhoek quando ele as descobriu em 1676. As bactérias são organismos unicelulares sem núcleo. Por serem tão pequenas, as bactérias só podem ser observadas ao microscópio. Esses organismos têm apenas alguns micrômetros de comprimento (um micrômetro tem 1/1000 de milímetro). Existem bactérias cobrindo sua pele, dentro de seu corpo e em muitos outros lugares. Apenas cerca de 1 por cento das bactérias são prejudiciais. A maioria das bactérias não é prejudicial nem útil. Por exemplo, bactérias úteis cobrem a superfície interna de alguns de seus órgãos, evitando que bactérias prejudiciais os infectem. Muitas bactérias neutras são encontradas em seu sistema digestivo, para prevenir infecções. Muitas bactérias ajudam o sistema imunológico. No entanto, algumas bactérias causam doenças; muitas doenças infecciosas são disseminadas pelo compartilhamento de saliva infectada por bactérias nocivas.
Alguns estudos encontraram diferenças nos tipos de infecções que acontecem depois de ser mordido por um ser humano ou um animal. Mas isso não me disse quais bactérias estão normalmente presentes. Ser mordido na mão por um humano causará infecção em um ser humano. No entanto, apenas 1 por cento das visitas ao pronto-socorro são por mordidas infecciosas de cães. Isso me fez pensar se os humanos e cães têm diferenças significativas no tipo e na quantidade de bactérias em sua boca.
Descrição do projeto
1. Encontrar o laboratório: depois de decidir que tinha uma hipótese testável, tive que encontrar um laboratório para realizar meu experimento. solicitação de doação para o Laboratório de Higiene Estadual da Universidade de Iowa explicando o que eu queria fazer lá e o que estava tentando descobrir. Minha doação foi aceita e um mentor foi designado para trabalhar comigo no estabelecimento.
2. Materiais:
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- 12 zaragatoas Fisher “s Finest
- placas de ágar 12 gram-negativos
- 12 placas de ágar sangue
- laços descartáveis
- Equipamentos de segurança: luvas, óculos, jaleco
3. Variáveis, controles e tamanho da amostra: A única variável que eu estava testando era a diferença entre as espécies. O controle era a saliva humana. Tive cinco amostras humanas e sete amostras de cães devido aos materiais limitados que o laboratório me ofereceu.
4. Obtendo as amostras: De 20 a 21 de junho de 2010, procurei cinco de meus vizinhos que são donos de cães e obtive amostras de saliva. Pedi aos donos dos cães que testassem seus cães e a si próprios com cotonetes separados. Pedi aos participantes que não escovassem os dentes ou comessem antes da amostragem para garantir que os testes não fossem comprometidos. Isso garantiu que a única variável testada era a diferença entre as bocas dos cães e dos humanos. Usei os cotonetes Fishers Finest para limpar suas línguas. Coloquei os cotonetes na geladeira até que fui colocá-los em placas em 21 de junho de 2010. Fiz questão de manter os indivíduos anônimos, rotulando-os de Humano 1 a 5 ou Cão 1 a 5.
5. Plaqueamento da bactéria: em 21 de junho de 2010, fui ao Laboratório de Higiene Estadual da Universidade de Iowa para realizar a placa de bactérias em ágar. Usei placas de ágar sangue que mostram bactérias gram-negativas e gram-positivas, e placas de ágar gram-negativas que contêm antibióticos gram-positivos para que apenas bactérias gram-negativas possam crescer.
O grama mancha de bactérias é uma forma de classificar as bactérias com base em suas paredes celulares.Para fazer a coloração de Gram, você coloca uma amostra da bactéria em um prato, mancha de roxo com um produto químico, retira a mancha com álcool e, em seguida, mancha com um produto químico rosa. Se as bactérias ficarem roxas, elas serão gram-positivas, o que significa que suas paredes celulares absorveram a substância química roxa. Se as bactérias são rosa, elas são Gram-negativas, o que significa que suas paredes celulares não absorvem a substância química roxa, mas sim a rosa. Células Gram-positivas geralmente são encontradas na boca ou na pele, e gram células negativas são geralmente encontradas nos intestinos.
Primeiro limpei um quarto da placa de ágar e, em seguida, usei uma alça para espalhar as bactérias de modo que quando as bactérias crescessem , Eu poderia ter uma ideia melhor de sua quantidade. Para placas bactérias, você primeiro risca um quarto da placa e, em seguida, pega algumas das bactérias que colocou na placa e esfrega-as ao longo do lado seguinte da placa usando um instrumento chamado de loop. Em seguida, você desinfeta o loop e pega algumas das bactérias da primeira vez que o usou e esfrega no quadrante seguinte. Por fim, você desinfeta o loop novamente e pega um pouco das bactérias da segunda vez que o usou e esfrega no resto da parte intocada da placa (veja o diagrama).
Aprendi com meu mentor como os cientistas descrevem a quantidade de bactérias nas placas. Ela me ensinou que se, após alguns dias, houvesse apenas culturas de bactérias no local original que você semeou com o cotonete, diria que há uma quantidade “rara” de bactérias na placa. Se houver culturas de bactérias no primeiro lado em que você usou o loop, você descreveria a quantidade de bactérias como “poucas”. Se houvesse culturas de bactérias na parte da placa onde você usou o loop pela segunda vez, você descreveria a quantidade de bactérias como “moderada”. Se houver culturas de bactérias no último lugar em que você usou o loop, você descreveria a quantidade de bactérias como “muitas”.
6. Cultivo de bactérias: Após as culturas serem mantidas em uma incubadora a 35 ° C por 24 horas, observei seu crescimento.
7. Analisando as placas: No dia seguinte, voltei ao laboratório e analisei as placas. Descrevi a quantidade de bactérias usando o método descrito acima. Também determinei quantas colônias de bactérias havia por suas diferentes formas, tamanhos e cores. Todas as observações foram registradas em meu caderno de laboratório. Quando terminei de analisar as placas, elas foram autoclavadas e descartadas pelo Laboratório de Higiene.
As amostras de placas de Petri de cães têm muitas bactérias diferentes, como pode ser visto nas diferentes cores e formas das colônias de bactérias. A maioria dessas placas seria descrita como tendo colônias raras ou poucas de bactérias devido à posição de todas as colônias.
As amostras de placas de Petri humanas têm, em sua maioria, as mesmas bactérias achatadas marrons ou brancas, ao contrário das muito diversas amostras de cães. A maioria dessas amostras variaria de níveis de bactérias “poucos” a “moderados”. Estas são placas de ágar sangue que permitem o crescimento de bactérias gram-negativas e gram-positivas.
Eu registrei a quantidade de bactérias em cada placa e tentei estimar quantas colônias bacterianas diferentes havia em cada placa . (Tive de fazer uma estimativa porque é quase impossível encontrar o número exato.) Quando cheguei em casa, fiz a média dos dados para entendê-los melhor. Primeiro descobri a quantidade média de bactérias totais para cães e humanos, bactérias gram-positivas e bactérias gram-negativas. Para fazer isso, atribuí uma escala de avaliação em que raro = 1, poucos = 2, moderado = 3 e muitos = 4. Fiz a média dos resultados e os registrei na tabela de dados.
Resultados
Descobri que o total médio de bactérias humanas é 3, o que é uma classificação “moderada”. O total médio de bactérias caninas foi de 2,7 (entre “poucas” e “moderadas”). O total médio de bactérias gram-negativas em cães foi de 0,9, o que é “raro”. O total médio de bactérias gram-negativas humanas foi de 0,2, o que seria considerado “muito raro”. O total médio de bactérias gram-positivas em cães foi de 1,9, o que é quase “poucas”. O total médio de bactérias gram-positivas para humanos foi de 2,8, o que é quase “moderado”. (Esses números serão interpretados posteriormente em minha conclusão.)
O número médio de bactérias gram-positivas na boca de um ser humano era 4.2 colônias. A boca humana tinha mais bactérias gram-positivas (o tipo de bactéria geralmente encontrado na boca ou na pele) do que os cães. Ainda assim, a boca humana tinha menos bactérias gram-negativas (esse tipo de bactéria está principalmente nos intestinos) do que os cães? Isso faz sentido, porque os cães provavelmente contraem bactérias gram-negativas ao farejar excrementos de cães ou traseiros de cães. Os humanos provavelmente têm mais bactérias gram-positivas por causa do ambiente em suas bocas.
Também fiz a média da qualidade de as placas ou quantos tipos diferentes de bactérias foram encontrados em cada placa (ver gráfico). O total médio para cães foi de 5,6 colônias bacterianas diferentes. O total médio para humanos foi de 4,1 tipos diferentes de colônias bacterianas. O número médio de gramas bactérias negativas na boca de um cão eram 2 colônias. O número médio de bactérias Gram-negativas na boca de um ser humano foi de 0,2 colônias. (Uma pessoa em cada cinco tinha uma colônia de bactérias Gram-negativas.) O número médio de bactérias Gram-positivas na boca de um cão foi 3,7 colônias. (Esses números também serão interpretados em minha conclusão.)
O gráfico mostra que as bocas humanas têm mais bactérias gram-positivas e ainda menos bactérias gram-negativas do que os cães (conforme mostrado na tabela de dados médios). Os cães têm um total maior de colônias bacterianas. Isso pode ocorrer porque os cães coletam muitos tipos diferentes de bactérias gram-negativas ao farejar resíduos e bumbum de outros cães. Os cães também pegam bactérias das coisas que cheiram e lambem. Embora os humanos escovem muito os dentes e limpem a boca com frequência, há ainda existem muitas bactérias em suas bocas. Isso provavelmente ocorre porque existem muitas bactérias inofensivas no mundo que vivem naturalmente na boca humana.
Conclusão
Concluí que o cão e A flora da boca humana é muito diferente. (Flora significa a bactéria encontrada na boca ou em qualquer outro lugar.) As bactérias encontradas na boca humana são mais semelhantes às bactérias orais de outro ser humano do que as bactérias encontradas na boca de um cachorro.
Também concluí que “a boca dos cães é mais limpa do que a dos humanos” em alguns aspectos e mais suja em outros. Os humanos têm mais bactérias na boca do que os cães, com base no número total de bactérias. A maioria dos humanos tinha um número “moderado” de bactérias, e a maioria dos cães tinha “poucas” bactérias. Uma possível explicação para isso pode ser que os cães ofegam muito e, talvez, enquanto ofegam, as bactérias caem de suas línguas junto com sua saliva. Mas os cães tinham mais tipos de bactérias. O número médio de colônias bacterianas diferentes na boca de um cachorro era de cerca de 5,7. O número médio de colônias bacterianas diferentes na boca de um ser humano era de cerca de 4,1. Acho que é assim porque os cães farejam e lambem uma variedade de coisas, como tapetes, pisos, cadeiras, grama etc., então eles pegam bactérias de muitos lugares.
Os cães têm mais bactérias gram-negativas em suas bocas. Acho que é porque muitas vezes cheiram e lambem coisas no chão. Como as bactérias gram-negativas geralmente são encontradas apenas nos intestinos, talvez os cães fiquem com a bactéria na boca porque farejam a bunda de outros cães. Quando fazem isso, podem pegar algumas bactérias gram-negativas em seu nariz que costumavam estar em o intestino do outro cão; então, mais tarde, o cachorro lamberá o nariz, levando a bactéria para a boca. Os humanos têm mais bactérias gram-positivas em suas bocas. Acho que é assim porque a boca humana fornece um ambiente adequado para bactérias gram-positivas.
Em conclusão, vou deixar meu cachorro continuar a me lamber? A resposta à pergunta é sim! Vou me sentir inocente por deixar meu cachorro me lamber porque descobri que as bactérias orais humanas e caninas são diferentes, então as bactérias orais do meu cachorro não representam nenhum dano para mim.
Pesquisa adicional
Eu gostaria de pesquisar quais tipos de bactérias gram-negativas são encontradas na boca dos cães e de onde elas vieram para ver se minhas hipóteses são verdadeiras. Também gostaria de ver se escovar os dentes dos cães diariamente ajudaria a prevenir o crescimento de bactérias nocivas em suas bocas. Realizar esse experimento em uma escala maior com mais indivíduos ajudará a apoiar minha conclusão. Sabe-se que os dados são mais confiáveis quando há estão mais assuntos sendo testados.
Agradecimentos
Eu gostaria de agradecer minha mãe por me encorajar a escrever uma bolsa para trabalhar no Laboratório de Higiene Estadual da Universidade de Iowa. gostaria de agradecer a Gabriella Gerken por ser uma ótima mentora e por me ensinar muito sobre como plaquear bactérias e compreender a coloração de Gram. Gostaria de agradecer a meu pai por me ajudar a entender mais sobre o mundo das bactérias.
Sou muito grato por ter tido a experiência de trabalhar em um laboratório universitário aos 13 anos. Aprendi muito trabalhando com placas de ágar e bactérias. Ficarei perfeitamente feliz se não ganhar, porque o experiência foi incrível e muito educacional, e estou tão feliz por posso compartilhar minhas descobertas com o mundo.
Bibliografia
“Bactérias.” Wikipedia. 29 de novembro de 2009.Obtido em http://en.wikipedia.org/wiki/Bacteria
Brook, I. “Microbiologia e Gerenciamento de Infecções de Feridas por Mordeduras em Animais e Humanos.” Atenção primária 1 (30 de março de 2003): 25-39.