Phosphatbufret saltvand

Der er mange forskellige måder at fremstille PBS-opløsninger på (en af dem er Dulbeccos fosfatbufrede saltvand (DPBS), som har den samme sammensætning end den i standard PBS) Nogle formuleringer indeholder ikke kalium og magnesium, mens andre indeholder calcium og / eller magnesium (afhængigt af om bufferen anvendes på levende eller fast væv eller ej: sidstnævnte kræver ikke KCl eller MgCl2).

Start med 800 ml destilleret vand for at opløse alle salte. Tilsæt destilleret vand til et samlet volumen på 1 liter. Den resulterende 1 × PBS vil have en slutkoncentration på 157 mM Na +, 140 mM Cl−, 4,45 mM K +, 10,1 mM HPO42−, 1,76 mM H2PO4− og en pH på 7,96. Tilsæt 2,84 mM HCI for at skifte pufferen til 7,3 mM HPO42− og 4,6 mM H2PO4− til en endelig pH på 7,4 og en Cl− koncentration på 142 mM.

pH i PBS er ~ 7,4. Når der fremstilles bufferopløsninger, er det god praksis at altid måle pH direkte ved hjælp af en pH-meter. Om nødvendigt kan pH justeres med hydr och saltsyre eller natriumhydroxid.

PBS kan også fremstilles ved anvendelse af kommercielt fremstillede PBS-buffertabletter eller poser.

Hvis det anvendes i celledyrkning, kan opløsningen fordeles i portioner og steriliseres. ved autoklavering eller filtrering. Sterilisering er muligvis ikke nødvendig afhængigt af brugen. PBS kan opbevares ved stuetemperatur eller i køleskabet. Imidlertid kan koncentrerede stamopløsninger udfældes ved afkøling og bør opbevares ved stuetemperatur, indtil bundfaldet er helt opløst inden brug.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret. Krævede felter er markeret med *