Robert Reiner blev født i New York City af Estelle Reiner (født Lebost) og Emmy-vindende skuespiller, komiker, forfatter og producent Carl Reiner.
Som barn , han så ofte op til sin far som hans inspiration og rollemodel. Carl Reiner var på The Dick Van Dyke Show, som han skabte og også medvirkede i. Estelle var inspirationen til Rob Reiner til at blive instruktør. Hendes historie som sanger hjalp ham med at forstå, hvordan musik blev brugt i en scene. Rob følte sig ofte presset over at måle op til sin fars tolv emmier og prestigefyldte priser og vellykket rækkefølge.
Da Rob dimitterede gymnasiet, rådede hans forældre ham til at deltage i Summer Theatre. Reiner fik et job som lærling i Bucks County Playhouse i Pennsylvania. Han gik for at blive videreuddannet på UCLA Film School. Reiner følte, at han stadig ikke havde succes, selv med at have en tilbagevendende rolle på en af de største shows i landet, All in the Family. Reiner begyndte sin instruktørkarriere med de Oscar-nominerede film This Is Spinal Tap, Stand By Me og The Princess Bride.
Med disse succesrige box-office-film i 1987 grundlagde Reiner sit eget produktionsselskab, Castle Rock Entertainment, sammen med Martin Shafer, Andrew Scheinman, Glenn Padnick og Alan Horn. For Castle Rock Entertainment gik han til at styre de Oscar-nominerede film When Harry Met Sally, Misery og A Few Good Men. Reiner anerkender ofte den tidligere co-stjerne Carroll O “Connor i at hjælpe ham med at komme ind i regi-forretningen og vise Reiner rebene.
Reiner er også kendt som en politisk aktivist, der medstifter American Foundation for Equal Rights, en gruppe det var en rådgivning for ægteskab af samme køn. Reiner har talt ved flere stævner om flere kontroversielle emner og ses også som en talsmand for sociale spørgsmål som vold i hjemmet og tobaksbrug.
Reiner har også lavet komos på vis som 30 Rock, The Simpsons og Hannah Montana og i filmene The First Wives Club, Bullets Over Broadway, Primary Colors og Throw Momma From The Train, blandt mange andre.