Fosfátem pufrovaný solný roztok

Existuje mnoho různých způsobů přípravy roztoků PBS (jedním z nich je Dulbeccoův fosfátový pufrovaný solný roztok (DPBS), který má stejné složení jako standardní PBS) . Některé formulace neobsahují draslík a hořčík, zatímco jiné obsahují vápník a / nebo hořčík (podle toho, zda se pufr používá nebo nepoužívá na živou nebo fixovanou tkáň: ta nevyžaduje KCl ani MgCl2).

Začněte s 800 ml destilované vody k rozpuštění všech solí. Přidejte destilovanou vodu do celkového objemu 1 litr. Výsledný 1 × PBS bude mít konečnou koncentraci 157 mM Na +, 140 mM Cl−, 4,45 mM K +, 10,1 mM HPO42−, 1,76 mM H2PO4− a pH 7,96. Přidejte 2,84 mM HC1, aby se pufr posunul na 7,3 mM HPO42− a 4,6 mM H2PO4− pro konečné pH 7,4 a koncentraci Cl− 142 mM.

pH PBS je ~ 7,4. Při výrobě pufrovacích roztoků je dobré měřit pH vždy přímo pomocí pH metru. V případě potřeby lze pH upravit pomocí hydr. kyselina ochlorová nebo hydroxid sodný.

PBS lze také připravit pomocí komerčně vyráběných PBS pufrovacích tablet nebo sáčků.

Pokud se používá při buněčné kultivaci, lze roztok dávkovat do alikvotů a sterilizovat autoklávováním nebo filtrací. V závislosti na jeho použití nemusí být nutná sterilizace. PBS lze skladovat při pokojové teplotě nebo v chladničce. Koncentrované zásobní roztoky se však po ochlazení mohou vysrážet a měly by se před použitím uchovávat při pokojové teplotě, dokud se sraženina úplně nerozpustí.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna. Vyžadované informace jsou označeny *