Soluzione salina tamponata con fosfato

Esistono molti modi diversi per preparare le soluzioni PBS (uno di questi è la soluzione salina tamponata con fosfato (DPBS) di Dulbecco, che ha la stessa composizione di quella del PBS standard) Alcune formulazioni non contengono potassio e magnesio, mentre altre contengono calcio e / o magnesio (a seconda che il tampone venga utilizzato o meno su tessuto vivo o fisso: questultimo non necessita di KCl o MgCl2).

Inizia con 800 mL di acqua distillata per sciogliere tutti i sali. Aggiungere acqua distillata a un volume totale di 1 litro. Il risultante 1 × PBS avrà una concentrazione finale di 157 mM Na +, 140 mM Cl−, 4,45 mM K +, 10,1 mM HPO42−, 1,76 mM H2PO4− e un pH di 7,96. Aggiungere 2,84 mM di HCl per spostare il tampone a 7,3 mM HPO42− e 4,6 mM H2PO4− per un pH finale di 7,4 e una concentrazione di Cl− di 142 mM.

Il pH del PBS è ~ 7,4. Quando si preparano soluzioni tampone, è buona norma misurare sempre il pH direttamente utilizzando un pHmetro. Se necessario, il pH può essere regolato utilizzando lidr acido cloridrico o idrossido di sodio.

Il PBS può anche essere preparato utilizzando compresse o sacchetti tampone PBS prodotti in commercio.

Se utilizzato nella coltura cellulare, la soluzione può essere dispensata in aliquote e sterilizzata in autoclave o filtrazione. La sterilizzazione potrebbe non essere necessaria a seconda del suo utilizzo. PBS può essere conservato a temperatura ambiente o in frigorifero. Tuttavia, le soluzioni stock concentrate possono precipitare una volta raffreddate e devono essere mantenute a temperatura ambiente fino a quando il precipitato non si è completamente sciolto prima delluso.

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