Solución salina tamponada con fosfato

Hay muchas formas diferentes de preparar soluciones de PBS (una de ellas es la solución salina tamponada con fosfato (DPBS) de Dulbecco, que tiene la misma composición que la del PBS estándar) . Algunas formulaciones no contienen potasio y magnesio, mientras que otras contienen calcio y / o magnesio (dependiendo de si el tampón se usa o no en tejido vivo o fijo: este último no requiere KCl ni MgCl2).

Comience con 800 mL de agua destilada para disolver todas las sales. Agregue agua destilada hasta un volumen total de 1 litro. El 1 × PBS resultante tendrá una concentración final de 157 mM Na +, 140 mM Cl−, 4,45 mM K +, 10,1 mM HPO42−, 1.76 mM H2PO4− y un pH de 7.96. Agregue 2.84 mM de HCl para cambiar el tampón a 7.3 mM HPO42− y 4.6 mM H2PO4− para un pH final de 7.4 y una concentración de Cl− de 142 mM.

El pH de PBS es ~ 7,4. Al preparar soluciones tampón, es una buena práctica medir siempre el pH directamente con un medidor de pH. Si es necesario, el pH se puede ajustar con hidr. ácido clorhídrico o hidróxido de sodio.

El PBS también se puede preparar usando tabletas o bolsas de tampón PBS fabricadas comercialmente.

Si se usa en cultivo celular, la solución se puede dispensar en alícuotas y esterilizar por autoclave o filtración. La esterilización puede no ser necesaria dependiendo de su uso. El PBS se puede almacenar a temperatura ambiente o en el refrigerador. Sin embargo, las soluciones madre concentradas pueden precipitar cuando se enfrían y deben mantenerse a temperatura ambiente hasta que el precipitado se haya disuelto por completo antes de su uso.

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