Es gibt viele verschiedene Möglichkeiten, PBS-Lösungen herzustellen (eine davon ist Dulbeccos phosphatgepufferte Kochsalzlösung (DPBS), die dieselbe Zusammensetzung wie Standard-PBS aufweist). Einige Formulierungen enthalten kein Kalium und Magnesium, während andere Calcium und / oder Magnesium enthalten (abhängig davon, ob der Puffer auf lebendem oder festem Gewebe verwendet wird oder nicht: Letzteres erfordert kein KCl oder MgCl2).
Beginnen Sie mit 800 ml destilliertem Wasser, um alle Salze aufzulösen. Fügen Sie destilliertes Wasser zu einem Gesamtvolumen von 1 Liter hinzu. Das resultierende 1 × PBS hat eine Endkonzentration von 157 mM Na +, 140 mM Cl–, 4,45 mM K +, 10,1 mM HPO42–, 1,76 mM H2PO4– und ein pH von 7,96. Fügen Sie 2,84 mM HCl hinzu, um den Puffer auf 7,3 mM HPO42– und 4,6 mM H2PO4– für einen End-pH von 7,4 und eine Cl– -Konzentration von 142 mM zu verschieben.
Der pH-Wert von PBS beträgt ~ 7,4. Bei der Herstellung von Pufferlösungen empfiehlt es sich, den pH-Wert immer direkt mit einem pH-Meter zu messen. Falls erforderlich, kann der pH-Wert mit hydr eingestellt werden Salzsäure oder Natriumhydroxid. PBS kann auch unter Verwendung von handelsüblichen PBS-Puffertabletten oder -beuteln hergestellt werden. Bei Verwendung in der Zellkultur kann die Lösung in Aliquots verteilt und sterilisiert werden durch Autoklavieren oder Filtrieren. Je nach Verwendung ist möglicherweise keine Sterilisation erforderlich. PBS kann bei Raumtemperatur oder im Kühlschrank gelagert werden. Konzentrierte Stammlösungen können jedoch beim Abkühlen ausfallen und sollten bei Raumtemperatur aufbewahrt werden, bis sich der Niederschlag vor der Verwendung vollständig aufgelöst hat