Verknüpfungsinformationen aus der Transformation
Die Transformation war in mehreren Bereichen der Bakterienforschung ein sehr nützliches Werkzeug. Wir erfahren später, wie es in einigen der modernen Techniken der Gentechnik verwendet wird. Hier untersuchen wir seine Nützlichkeit bei der Bereitstellung von Verknüpfungsinformationen.
Wenn DNA (das bakterielle Chromosom) für Transformationsexperimente extrahiert wird, ist ein gewisser Bruch in kleinere Stücke unvermeidlich. Wenn sich zwei Spendergene auf dem Chromosom nahe beieinander befinden, besteht eine größere Wahrscheinlichkeit, dass sie auf demselben Stück transformierender DNA übertragen werden und daher eine doppelte Transformation verursachen. Wenn umgekehrt Gene auf dem Chromosom weit voneinander entfernt sind, werden sie auf getrennten Transformationssegmenten übertragen, und die Frequenz der Doppeltransformanten entspricht dem Produkt der Einzeltransformationsfrequenzen. Daher sollte es möglich sein, eine enge Verknüpfung zu testen, indem auf Abweichungen von der Produktregel geprüft wird.
Leider wird die Situation durch mehrere Faktoren komplexer – von denen der wichtigste darin besteht, dass nicht alle Zellen in einer Population von Bakterien sind kompetent oder in der Lage, transformiert zu werden. Da einzelne Transformationen als Proportionen ausgedrückt werden, hängt der Erfolg der Produktregel von der absoluten Größe dieser Proportionen ab. Es gibt Möglichkeiten, den Anteil kompetenter Zellen zu berechnen, aber wir müssen jetzt nicht auf dieses Thema eingehen. Sie können Ihre Fähigkeiten in der Transformationsanalyse in einem der Probleme am Ende des Kapitels verbessern, das eine 100-prozentige Kompetenz der Empfängerzellen voraussetzt.