Introduction
« Abby! Ne laisse pas le chien te lécher! » Sa langue est pleine de bactéries! « Depuis que nous avons un chien il y a quelques années, ma mère a toujours dit ça. Jadore quand mon chien court me saluer quand je rentre de lécole et me dit » bonjour « en me donnant Mais ce que je détestais, cétait de me sentir coupable et dégoûté davoir ses bactéries de chien partout sur mon visage. Jai donc décidé de faire un test pour voir à quel point les langues des chiens sont sales.
Hypothèse
Jai émis lhypothèse que les langues humaines seraient plus propres que les langues de chien. Jai pensé cela parce que les humains se brossent les dents au moins une fois par jour. Jai émis lhypothèse que les langues des chiens seraient sales parce quils léchaient toujours des choses sales comme les ordures.
Recherche de base
Jai lu des articles sur les bactéries sur un certain nombre de sites Web, y compris lUniversité de Musée californien de paléontologie et Wikipedia. Jai également lu un article du Journal de lAmerican Academy of Dermatology intitulé « Dog, Cat, and Human Bites: A Review ». Enfin, jai lu un article du Journal of Clinical Microbiology intitulé « Cultivable Oral Microbiota of Domestic Dogs ».
Ce que jai appris de mes études de bactériologie, cest que les bactéries ont dabord été appelées « animalcules » par Antonie van Leeuwenhoek quand il les a découvertes en 1676. Les bactéries sont des organismes unicellulaires sans noyau. Parce quelles sont si petites, les bactéries ne peuvent être observées quau microscope. Ces organismes ne mesurent que quelques micromètres de long (un micromètre vaut 1 / 1000e de millimètre). Des bactéries recouvrent votre peau, à lintérieur de votre corps et dans de nombreux autres endroits. Seulement environ 1 pour cent des bactéries sont nocives. La plupart des bactéries ne sont ni nocives ni utiles. Par exemple, des bactéries utiles recouvrent la surface intérieure de certains de vos organes, empêchant les bactéries nocives dinfecter vos organes. Un grand nombre de bactéries neutres se trouvent dans votre système digestif, pour prévenir les infections. De nombreuses bactéries aident votre système immunitaire. Cependant, certaines bactéries causent des maladies; de nombreuses maladies infectieuses se propagent par le partage de salive infectée par des bactéries nocives.
Certaines études ont trouvé des différences dans les types dinfections qui surviennent après avoir été mordu par un humain ou un animal. Mais cela ne ma pas dit quelles bactéries sont normalement présentes. Être mordu à la main par un humain provoquera une infection chez un humain. Pourtant, seulement 1% des visites aux urgences concernent des morsures infectieuses de chiens. Cela ma fait me demander si les humains et les chiens ont des différences significatives dans le type et la quantité de bactéries dans leur bouche.
Description du projet
1. Recherche du laboratoire: Après avoir décidé que javais une hypothèse testable, jai dû trouver un laboratoire dans lequel effectuer mon expérience. Jai écrit un demande de subvention au State Hygienic Lab de lUniversité de lIowa expliquant ce que je voulais y faire et ce que jessayais de découvrir. Ma subvention a été acceptée et un mentor ma été affecté pour travailler avec moi dans létablissement.
2. Matériel:
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- 12 écouvillons Fisher « s Finest
- 12 plaques de gélose Gram négatif
- 12 plaques de gélose au sang
- Anneaux jetables
- Équipement de sécurité: gants, lunettes, blouse de laboratoire
3. Variables, contrôles et taille de léchantillon: La seule variable que je testais était la différence entre les espèces. Le contrôle était la salive humaine. Jai eu cinq échantillons humains et sept échantillons de chiens en raison du matériel limité que le laboratoire ma offert.
4. Obtenir les échantillons: Du 20 au 21 juin 2010, je suis allé voir cinq de mes voisins propriétaires de chiens et jai obtenu des échantillons de salive. Jai demandé aux propriétaires des chiens de tester leurs chiens et eux-mêmes avec des écouvillons séparés. Jai demandé aux sujets de ne pas se brosser les dents ou de ne pas manger avant léchantillonnage pour massurer que les tests nétaient pas compromis. Cela assurait que la seule variable testée était la différence entre la bouche des chiens et des humains. Jai utilisé les écouvillons Fishers Finest pour tamponner leurs langues. Jai mis les écouvillons au réfrigérateur jusquà ce que je les assiette le 21 juin 2010. Je me suis assuré de garder les sujets anonymes en les étiquetant Humain 1 à 5 ou Chien 1 à 5.
5. Plaquage des bactéries: Le 21 juin 2010, je suis allé au State Hygienic Lab de lUniversité de lIowa pour plaquer les bactéries sur de la gélose. Jai utilisé des plaques de gélose au sang qui montrent à la fois des bactéries à Gram négatif et à Gram positif, et des plaques de gélose à Gram négatif contenant des antibiotiques à Gram positif afin que seules les bactéries à Gram négatif puissent se développer.
Le gramme la coloration des bactéries est un moyen de classer les bactéries en fonction de leurs parois cellulaires.Pour faire la coloration de Gram, vous placez un échantillon de la bactérie sur une assiette, vous la colorez en violet avec un produit chimique, vous la décolorez avec de lalcool, puis vous la colorez avec un produit chimique rose. Si les bactéries se colorent en violet, elles sont à Gram positif, ce qui signifie que leurs parois cellulaires ont absorbé le produit chimique violet. Si les bactéries sont roses, elles sont Gram-négatives, ce qui signifie que leurs parois cellulaires nont pas absorbé le produit chimique violet mais ont absorbé le rose. Les cellules Gram-positives se trouvent généralement dans la bouche ou sur la peau, et Gram -les cellules négatives se trouvent généralement dans les intestins.
Jai dabord tamponné un quart de la plaque de gélose, puis jai utilisé une boucle pour propager les bactéries de sorte que lorsque les bactéries se sont développées , Je pourrais avoir une meilleure idée de leur quantité. Pour plaquer les bactéries, vous commencez par strier un quart de la plaque, puis vous prenez certaines des bactéries que vous avez placées sur la plaque et frottez-les le long du côté suivant de la plaque à laide dun instrument appelée boucle. Ensuite, vous désinfectez la boucle et prenez une partie des bactéries de la première fois que vous avez utilisé la boucle et frottez-la sur le quadrant suivant. Enfin, vous désinfectez à nouveau la boucle et prenez une partie des bactéries de la deuxième fois que vous avez utilisé la boucle et frottez-la autour du reste de la partie intacte de la plaque (voir schéma).
Jai appris de mon mentor la façon dont les scientifiques décrivent la quantité de bactéries sur les plaques. Elle ma appris que si, après quelques jours, il ny avait que des cultures de bactéries à lendroit dorigine où vous avez strié lécouvillon, vous diriez quil y a une quantité «rare» de bactéries sur la plaque. Sil y a des cultures bactériennes du premier côté sur lequel vous avez utilisé la boucle, vous décririez la quantité de bactéries comme «peu nombreuse». Sil y avait des cultures de bactéries sur la partie de la plaque où vous avez utilisé la boucle pour la deuxième fois, vous décririez la quantité de bactéries comme «modérée». Sil y a des cultures de bactéries au dernier endroit où vous avez utilisé la boucle, vous décririez la quantité de bactéries comme « plusieurs ».
6. Cultiver les bactéries: Après avoir conservé les cultures dans un incubateur à 35 ° C pendant 24 heures, jai observé leur croissance.
7. Analyse des plaques: Le lendemain, je suis retournée au laboratoire et jai analysé les plaques. Jai décrit la quantité de bactéries en utilisant la méthode décrite ci-dessus. Jai également déterminé combien de colonies bactériennes il y avait par leurs différentes formes, tailles et couleurs. Toutes les observations ont été enregistrées dans mon cahier de laboratoire. Lorsque jai fini danalyser les plaques, elles ont été autoclavées et éliminées par le laboratoire dhygiène.
Les échantillons de boîtes de Petri pour chiens contiennent de nombreuses bactéries différentes, comme le montrent les différentes couleurs et formes des colonies de bactéries. La plupart de ces plaques seraient décrites comme ayant des colonies de bactéries rares ou peu nombreuses en raison de la position de toutes les colonies.
Les échantillons de boîtes de Pétri humaines contiennent pour la plupart les mêmes bactéries plates brunes ou blanches, contrairement aux très diverses échantillons de chiens. La plupart de ces échantillons varieraient de niveaux de bactéries «peu» à «modérés». Ce sont des plaques de gélose au sang qui permettent aux bactéries Gram-négatives et Gram-positives de se développer.
Jai enregistré la quantité de bactéries sur chaque plaque et jai essayé destimer le nombre de colonies bactériennes différentes sur chaque plaque . (Jai dû estimer car il est presque impossible de trouver le nombre exact.) Quand je suis rentré chez moi, jai fait la moyenne des données pour mieux les comprendre. Jai dabord trouvé la quantité moyenne de bactéries totales chez les chiens et les humains, les bactéries à Gram positif et les bactéries à Gram négatif. Pour ce faire, jai attribué une échelle de notation dans laquelle rare = 1, peu = 2, modéré = 3 et beaucoup = 4. Jai fait la moyenne des résultats et je les ai enregistrés dans le tableau de données.
Résultats
Jai trouvé que le total moyen des bactéries humaines était de 3, ce qui correspond à une note «modérée». Le total moyen pour les bactéries canines était de 2,7 (entre «peu» et «modéré»). Le total moyen de bactéries à Gram négatif chez les chiens était de 0,9, ce qui est «rare». Le total moyen de bactéries humaines à Gram négatif était de 0,2, ce qui serait considéré comme «très rare». Le total moyen de bactéries à Gram positif chez les chiens était de 1,9, ce qui est proche de «peu». Le total moyen de bactéries à Gram positif pour les humains était de 2,8, ce qui est presque «modéré». (Ces chiffres seront interprétés plus tard dans ma conclusion.)
Le nombre moyen de bactéries à Gram positif dans la bouche dun humain était de 4.2 colonies. La bouche humaine contenait plus de bactéries à Gram positif (le type de bactérie que lon trouve généralement dans la bouche ou sur la peau) que les chiens. Pourtant, la bouche humaine avait moins de bactéries à Gram négatif (ce type de bactérie se trouve principalement dans les intestins) que les chiens? Cela a du sens, car les chiens attrapent probablement des bactéries à Gram négatif en reniflant des excréments de chien ou des chiens « derrière. Les humains ont probablement plus de bactéries à Gram positif à cause de lenvironnement dans leur bouche.
Jai également fait la moyenne de la qualité de les plaques, ou combien de types différents de bactéries ont été trouvés dans chaque plaque (voir graphique). Le total moyen pour les chiens était de 5,6 colonies bactériennes différentes. Le total moyen pour les humains était de 4,1 types différents de colonies bactériennes. Le nombre moyen de bactéries négatives dans la bouche dun chien était de 2 colonies. Le nombre moyen de bactéries à Gram négatif dans la bouche dun humain était de 0,2 colonies. (Une personne sur cinq avait une colonie de bactéries à Gram négatif.) Le nombre moyen de bactéries à Gram positif dans la bouche dun chien était de 3,7 colonies. (Ces chiffres seront également interprétés dans ma conclusion.)
Le graphique montre que la bouche humaine a plus de bactéries Gram-positives mais moins de bactéries Gram-négatives que les chiens (comme indiqué dans le tableau des données moyennes). Les chiens ont un plus grand nombre de colonies bactériennes. Cela peut être dû au fait que les chiens recueillent de nombreux types de bactéries Gram-négatives en reniflant les déchets et les fesses des autres chiens. Les chiens attrapent également des bactéries dans les choses quils reniflent et lèchent. Bien que les humains se brossent souvent les dents et se nettoient souvent la bouche, il il y a encore beaucoup de bactéries dans leur bouche. Cest probablement parce quil y a beaucoup de bactéries inoffensives dans le monde qui vivent naturellement dans la bouche humaine.
Conclusion
Jai conclu que le chien et la flore de la bouche humaine est très différente. (La flore signifie les bactéries trouvées dans une bouche ou nimporte où ailleurs.) Les bactéries trouvées dans la bouche humaine sont plus semblables aux bactéries orales dun autre humain que les bactéries trouvées dans la bouche dun chien.
Jai également conclu que les chiens « ont la bouche plus propre que les humains » à certains égards, et plus sale à dautres égards. Les humains ont plus de bactéries dans la bouche que les chiens, daprès le nombre total de bactéries. La plupart des humains avait un nombre «modéré» de bactéries et la plupart des chiens avaient «peu» de bactéries. Une explication possible à cela pourrait être que les chiens halètent beaucoup, et peut-être quen haletant, les bactéries tombent de leur langue avec leur salive. Mais les chiens avaient plus de types de bactéries. Le nombre moyen de colonies bactériennes différentes dans la bouche dun chien était denviron 5,7. Le nombre moyen de colonies bactériennes différentes dans la bouche dun humain était denviron 4,1. Je pense que cest le cas parce que les chiens reniflent et lèchent une variété de choses, comme les tapis, les sols, les chaises, lherbe, etc., donc ils attrapent des bactéries à de nombreux endroits.
Les chiens ont plus de bactéries Gram négatif dans leur bouche. Je pense que cest parce quils reniflent et lèchent souvent des choses sur le sol. Étant donné que les bactéries à Gram négatif ne se trouvent généralement que dans les intestins, les chiens peuvent peut-être les attraper dans la bouche parce quils reniflent les fesses des autres chiens. Lorsquils le font, ils peuvent avoir des bactéries à Gram négatif sur leur nez qui se trouvaient auparavant dans lintestin de lautre chien; puis plus tard, le chien se lèchera le nez, mettant la bactérie dans sa bouche. Les humains ont plus de bactéries à Gram positif dans la bouche. Je pense que cest le cas parce que la bouche humaine offre un environnement qui convient aux bactéries à Gram positif.
En conclusion, est-ce que je vais laisser mon chien continuer à me lécher? La réponse à la question est oui! Je ne me sentirai pas coupable de laisser mon chien me lécher parce que jai découvert que les bactéries orales humaines et canines sont différentes, de sorte que les bactéries orales de mon chien ne me causent aucun mal.
Recherches complémentaires
Je voudrais rechercher quels types de bactéries à Gram négatif se trouvent dans la bouche des chiens et doù elles viennent pour voir si mes hypothèses sont vraies. Je voudrais également voir si le fait de se brosser les dents des chiens quotidiennement contribuerait à empêcher la croissance de bactéries nocives dans leur bouche. Mener cette expérience à plus grande échelle avec plus de sujets aidera à étayer ma conclusion. On sait que les données sont plus fiables lorsquelles sont disponibles. sont plus de sujets testés.
Remerciements
Je voudrais remercier ma mère de mavoir encouragé à écrire une bourse pour travailler au laboratoire dhygiène dÉtat de lUniversité de lIowa. Merci à Gabriella Gerken davoir été une excellente mentor et de mavoir tellement appris sur le placage des bactéries et la compréhension de la coloration de Gram. Je tiens à remercier mon père de mavoir aidé à mieux comprendre le monde des bactéries.
Je suis tellement reconnaissant davoir pu faire lexpérience de travail dans un laboratoire universitaire à lâge de 13 ans. Jai tellement appris en travaillant avec les plaques dagar et les bactéries. Je serai parfaitement heureux si je ne gagne pas, car le lexpérience était incroyable et très éducative, et je suis si heureuse partager mes découvertes avec le monde.
Bibliographie
«Bactéries». Wikipédia. 29 novembre 2009.Extrait de http://en.wikipedia.org/wiki/Bacteria
Brook, I. « Microbiologie et gestion des infections par morsures humaines et animales. » Primary Care 1 (30 mars 2003): 25-39.